产品描述

　　人多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒仅供研究使用。

　　详细介绍

　　规格: 96T/48T

　　品牌:R&D BIM

　　种属人大鼠小鼠

　　检测波长:450 nm

　　所需样本体积: 50-100ul

　　适用范围仅供科研

　　保存及有效期:2-8*C,六个月，-20°C- 年

　　检测目的用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、 尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

　　供应的种属有:大象、牛、大鼠、小鼠、人、马、兔、大熊猫、类人猿、蜥蜴、蝌蚪、菠菜、羊、犬、鱿鱼、蜗牛、扁豆、豌豆、马铃薯、蝈蝈、豚鼠、仓鼠、金黄地鼠、鹅、鸽子、秃鹫、河马、犀牛、野猪、东北虎斑鸠、蚯蚓、鲤鱼、眼镜蛇、青蛙、丹顶鹤、鸟类等动植物种属

　　实验原理

　　ELISA试剂盒实验原理:用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值， 计算样品浓度。

　　试剂盒组成

　　1、30倍浓缩洗涤液20mlx1瓶7终止液6mlx1瓶

　　2、酶标试剂6mlx1瓶8标准品(4800 pmol/L)0.5mlx1瓶

　　3、酶标包被板12孔x8条9标准品稀释液1.5mlx1瓶

　　4、样品稀释液6mlx1瓶10说明书1份

　　5、显色剂A液6mlx1瓶11封板膜2张

　　6、显色剂B液6mlx1/瓶12密封袋1个

　　样品类型

　　标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0 5ml的血清或血浆。每个

　　标本量收集体积=100ulx检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。

　　样品采集

　　收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4°C备用，如有特殊原因需要周期收集标本，

　　试剂盒的优点

　　特点:

　　1、灵敏度:有二层含义，1)为试剂检出被检物质的低量的能力;2)为试剂对大量样品中阳性检出的能力;

　　2、特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应，使测定结果升高，可能导致假阳性，所以交叉反应是评价其质量的关键指标;

　　3、精密度: ELISA试剂- 般指其批内CV%，其值应小于15%;定量试剂应同时考察线性范围;

　　4、准确度:通过添加回收实验进行评价;

　　5、简便性:指在不影响试剂的前三项指标的前题下，实验和测定步骤越少越好，在定性实验中结果判断简单明了，定量试验结果计算也应简单;

　　6、安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性;

　　7、经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本，而市场价格比较合理;

　　8、试剂评价:需要有权威的确证方法和确证的样品进行检测。

　　人多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒实验前的准备

　　1、仔细阅读说明书

　　2、确定试剂盒在有效期内

　　3、按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)

　　4、标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存)，尽量分装做备份。短期内无法实验者，注意低温保存

　　5、准备好所有实验额外所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等

　　6、根据检测标本数量确定所需试剂的量

　　7、按说明书将所用试剂平衡至室温，配制所需试剂

　　操作步骤

　　1、标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

　　2400 pmol/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

　　1200 pmol/L 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

　　600 pmol/L 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

　　300 pmol/L 2号标准品150ul的3号标准品加入150ul标准品稀释液

　　150 pmol/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

　　2、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50ul,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10ul (样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

　　3、温育:用封板膜封板后置37°C温育30分钟。

　　4、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

　　5、洗涤:小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5次，拍干。

　　6、加酶:每孔加入酶标试剂50ul,空白孔除外。

　　7、温育:操作同3.

　　8、洗涤:操作同5。

　　9、显色:每孔先加入显色剂A50ul,再加入显色剂B50μl, 轻轻震荡混匀，37°C避光显色10分钟.

　　10、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

　　11、测定:以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

　　用于检测未知抗体的间接法:

　　用包被缓冲液将已知抗原稀释至1 ~ 10μg/ ml,每孔加0.1ml, 4°C过夜。次日洗涤3次。

　　加一定稀释的待检样品(未知抗体) 0. 1ml于上述已包被之反应孔中,置37°C孵育1小时，洗涤。(同时做空白、 阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体) 0.1ml,37°C孵育30-60分钟，洗涤，后-遍用DDW洗涤。

　　加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml, 37*C 10 ~ 30分钟。

　　终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0 .05ml。

　　结果判定:可于白色背景上，直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、 “.”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上，于450nm (若以ABTS显色，则410nm) 处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照0D值的2.1倍，即为阳性。

　　计算方法

　　以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与0D值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

　　注意事项

　　1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如末用完，板条应装入密封袋中保存。

　　2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

　　3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。-次加样时间好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

　　4.请每次测定的同时做标准曲线，好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD 值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数(xnx5)。

　　5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6.底物请避光保存。

　　7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准

　　8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

　　9.本试剂不同批号组分不得混用。

　　配送服务

　　产品包装:在采样、发送、运输过程中有保冷温度要求的，公司均采用加厚款生物保温箱，内装生物冰袋，有效的控制产品温度，保证货物质量不受影响，同时并填充大量EPE发泡棉，具有优越的缓冲弹性，它就像成干上万的小弹簧紧紧地保护在邮寄物品周围，它能有效的吸收严酷的冲击力，使邮寄物品免于破损，保证货物完好送达您手。

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　　人多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒源自先进酶联免疫技术，涵盖国内外专家的经验与智慧。采用先进的技术和设备，确保品质的同时，降低成本，为更多有需要的研究人员，节省实验经费，保证实验质量，多家生物科研基地合作伙伴，实力团队倾力打造专注于elisa试剂盒的生产，研发，助力科研!